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微注射简介
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以细胞内微注射和微灌注技术为基础的玻璃针头(精细的玻璃微量毛细移液管)的使用,已经在越来越多的实验生物学研究领域中成为一项非常普遍的操作方法,比如在体外受精、转基因中等等。这些技术最恰当的话应当称其为显微外科操作,因为这些操作是通过单个的或多个的筒状玻璃微量移液管、精确的定位装置(显微操纵器)以及微量注射泵或微量灌注器来在单个的细胞上进行的。 这些操作中所使用的微量移液管是用一毛细管拉针器(pipette puller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其拉制成所需的合适大小的直径和锥形,微量移液管小头的直径(小至0.2微米与纤维操纵器的高精度相关,它可以用于精准的移液。这种精确度可以为各种类型和任意大小的细胞提供亚皮克升级或0.1微米(micron)范围内的精确的、重复性良好的细胞内和细胞旁注射。通过运用直接的水压(压力注射)或者不通过使用水流,而通过施加一电场来使带电离子运动(离子电渗法),都可以获得将微量移液管中的物质挤喷出去的效果。 微注射应用的范围非常广泛,从辅助(体外)细胞受精技术至分子和细胞基本组分的转运都需使用这一技术,比较典型的是将某些物质注射进细胞中以操作和/或监测某种特定的存活细胞中的基本机体生物化学状态。这些可以注射进细胞的物质包括有: 各种细胞器、激酶、组织化学标志物(比如辣根过氧化物酶或者荧光黄)、蛋白质、代谢物质、微磁头、离子、抗体、基因、分子生物学的mRNA和DNA,等等。运用这一技术,也可以实现用于单个细胞或一组细胞的较少量(皮升至毫升)药剂或药物的精确输送(微灌注),例如药理学的药物检验。 为了使科研人员能够顺利进行上述的实验并得到有意义的结果,这些实验中所使用的器具(设备)不仅应当有特殊的功能,还应当同时有很高的、过硬的质量,能够提供确保结果正确所需的可靠性、精确性以及可重复性。
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