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     新闻资讯

菌尿对尿液分析仪测定尿红细胞的影响探讨

   目的:观察菌尿是否对尿液分析仪(全自动尿沉渣分析仪UF-100和MIDITRON尿液分析仪)测定红细胞产生影响。
  方法:用UF-100和镜检法、MIDITRON和单克隆地分别测定菌尿、非菌尿尿液的红细胞(或潜血);取健康正常人尿液加入一定浓度的细菌(人工菌尿组),再用分析仪进行测定其红细胞。
  结果:①菌尿组UF-100细胞数假阳性率、尿潜血假阳性率(21.5%)明显高于非菌尿组(6.5%),两者经t检验,P<0.01。②MIDITRON测定菌尿组尿潜血假阳性率(19.5%)明显高于非菌尿组(4.5%),两者经t检验,P<0.01。③人工加入后尿液两种分析仪尿红细胞测定结果也明显高于对照组。
  结论:菌尿影响全自动和干化学尿沉渣分析仪尿红细胞测定结果,这对尿液检验质量控制有一定的帮助作用。
  尿红细胞检测是诊断泌尿系疾病、特别是肾病的重要实验指标之一。显微镜检查仍是目前检测尿液有形成份的主要手段。随着自动化尿液分析仪的问世,给尿常规过筛检测带来了一些方便,但该型仪器是否受菌尿的影响,造成尿红细胞实验结果差异,迄今未引起注意,本文对此进行了研究,现报告如下:
  材料与方法
  1.标本来源:①菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集门诊怀疑有泌尿系感染病人晨尿200例;②非菌尿:用一次性洁净塑料尿随机收院内确诊非泌尿系感染病人晨尿200例;③人工菌尿:用一次性洁净塑料尿杯随机收集我科正常性尿淮50例,然后将这些尿液标本随机加入培养细菌(属泌尿系感染的细菌,专用培养基培养[2])使用细菌数为105-107/ml之间,同时用不加细菌的尿液作为对照组。
  2.实验器材:①全自动尿沉渣分析仪UF-100(日本东亚公司);②MIDITRON型尿液分析仪(德国宝灵曼公司)及配套试带(批号:28567742);③单克隆潜血板(美国万华普曼公司);④Fast-ReaD10一次性尿沉渣定量分析仪(北京威士达公司)。
  3.实验方法:①尿红细胞的测定:用全自动尿沉渣定量分析仪、尿液分析仪(干化学法)和直接镜检法对红细胞进行测定。其方法为:尿液混匀后,用一次性专用试管分别取非菌尿组和菌尿组尿液10ml,直接在UF-100和MIDITRON,严格按说明书操作,记录实验结果(每天实验前用质控对仪器进行监控);同时用双盲法对上述尿液标本,用一次性滴管直接将尿液加入一次性尿板中,在高倍镜下计数10个大方格的红细胞数,以每微升红细胞平均数报告,所有试验均在2小时内完成。②尿潜血的测定:尿液混匀后,直接将尿液滴入4-5滴于潜血板反应孔内,于5分钟内观察结果。结果判断:在测试线及反应线上同时出现两条紫红色色带者为阳性(潜血板对血红蛋白的敏感性是0.2ng/ml),只在测试带出现一条紫红色色带者为阴性。
  结 果
  1.UF-100和镜检法测定菌尿组和非菌尿组尿液的尿红细胞结果分别为(204±123.0)×106/L和(108±98.1)×106/L。如果以镜检法检查尿红细胞为标准,则菌尿组UF-100测定红细胞数假阳性率为21.5%;而非菌尿组为6.5%。两者经t检验,P<0.01,差异极显著。
  2.MID、ITRON型尿液分析仪和单克隆潜血板法测定菌尿组和非菌尿组尿液的红细胞(或潜血)结果如果以单克隆潜血板法检查尿潜血为标准试验,则菌尿组尿液分析仪测定尿潜血假阳性率为19.5%;而非菌尿组的假阳性率为4.5%。两者经t检验,P<0.01,差异极显著。
  例人工菌尿加入前、后UF-100测定红细胞结果分别为(10±10.0)×106/L和(45±28.0)×106/L。经统计学处理,P<0.01,有显著性差异。MIDITRON型尿液分析仪加入前、后尿潜血见表1。经非参数统计学处理,P<0.01,显著性差异。
  讨论
  显微镜血尿是一系列泌尿系病理变化的初始信号,因此没有症状的血尿检测对疾病的早期诊断显得十分重要。同样,血尿检测的准确程度也同样重要,因为基于阳性发现病人要经历对身体有侵害和昂贵的泌尿学检查。目前,显微镜和干化学检查法是诊断显微镜血尿的两种常用方法。干化学法具有快速、操作简单,使得更具有吸引力。但是,干化学法在测定血尿中还存在一定的局限性,如尿中维生素C、的存在会导致干化学法红细胞检查的阴性;在泌尿系感染中,多数革兰氏阴性菌和某些革兰氏阳性菌可能释放过氧化歧化酶,这些物质和酶在干化学法测定尿红细胞时,都能使试带中的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出[O],后者使色源呈色而出现假阳性。本文结果显示:菌尿组MIDITRON型尿液分析仪测定红细胞为阳性而潜血板法为阴性占总检测数的百分比为19.5%;而非菌尿组的百分比为4.5%;同时又用培养细菌作成菌尿,再用尿液分析仪进行试验测定其红细胞,也得出同样的结果。因此可以肯定菌尿对尿红细胞测定有一定的影响。为了证实这一影响因素,笔者进行了下列两项实验:
  1.用常见的泌尿系感染的细菌,配制成不同浓度的细菌,放置15分钟后,用MIDITRON型尿液分析仪测定其红细胞,结果显示由于细菌种类不同,对尿红细胞测定结果影响程度也不相同(见表2),以假单胞菌属****,细菌浓度为104/ml即影响红细胞测定。
  2.过氧化酶配制成不同浓度,在用干化学尿液分析仪进行实验,结果显示:过氧化酶浓度为2U/ml时干化学法即呈阳性结果(见表3)。因此,我们认为菌尿是引起干化学法测定尿红细胞假阳性的原因之一;Heang也有同样的报道。
  全自动尿沉渣分析仪UF-100是目前用于测定尿液有形成份******的检测仪器,其原理是采用流式和电阻原理,利用细胞染色(两种染料,一种为菲啶染料,主要染细胞的核酸,这种染料主要的特点是膜渗透笥;另一种为羧花青染料,染料负电的细胞膜、核膜和线粒体)后,通过细胞荧光强度、前向散射光强度及细胞电阻的大小来区别细胞的类型和计数。由于红细胞没有细胞核,所以仪器根据荧光强度低和前向散射光强度低将其归为红细胞。而细菌虽然有核,但菲啶染料对膜渗透性低,所以染色后荧光强度和前向散射光强度也低(但比红细胞稍强),所以尿液中当细菌浓度超过一定时,仪器将较大的或成双的细菌(主要为葡萄球菌和链球菌)误认为尿红细胞。本文结果显示;在菌尿和非菌尿尿液中,尿红细胞UF-100测定≥15/μl分别占总检测数的21.5%和6.5%。两者P<0.01,说明差异极显著,这就说明细菌对全自动尿沉渣分析仪测定红细胞也有一定的影响作用,Tsukahara也有相同的报道[2]。
  总之,菌尿不仅干扰化学法测定尿细胞,而且也影响全自动尿沉渣分析仪对尿细胞测定,因此,在实验中发现菌尿时,最好使用显微镜检查法或者其他方法来加以鉴别,以免出现不必要的误诊。

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